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HRP標記兔抗山羊IgG(H+L)在免疫學檢測中的應用與特性

更新時間:2024-08-14      瀏覽次數(shù):208

HRP標記兔抗山羊IgG(H+L)在免疫學檢測中的應用與特性


定義:HRP是一種分子量約為44,000的糖蛋白,由無色的酶蛋白和深棕色的鐵卟啉結合而成,通常來源于辣根植物中。

特性:HRP具有比活性高、穩(wěn)定、分子量小、純酶容易制備等特點,因此在臨床檢驗試劑中常用。其易于提取、價格相對低廉,且性質穩(wěn)定,耐熱及有機溶劑的作用,與抗原或抗體偶聯(lián)后活性很少受損失。

應用:HRP是迄今為止在免疫學中應用最為廣泛的一種標記用酶,常用于免疫組織化學、蛋白質印跡(Western Blotting, WB)和酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)等實驗中。


HRP標記兔抗山羊IgG(H+L)

定義:HRP標記的兔抗山羊IgG(H+L)是一種二抗,其中HRP作為標記物與兔來源的、針對山羊IgG(包括重鏈和輕鏈)的抗體結合。

特異性:該二抗與山羊IgG分子有特異性反應,同時也可能與其他山羊免疫球蛋白(如IgM、IgE、IgD、IgA等)的輕鏈發(fā)生交叉反應。然而,它通常不會與血清中的非免疫球蛋白成分發(fā)生交叉反應,但可能與其他種屬的免疫球蛋白有交叉反應。

應用:

Western Blotting:在WB實驗中,HRP標記的二抗能夠特異性地識別并結合山羊IgG,進而通過HRP的催化作用產生可見的信號(如化學發(fā)光或顯色反應),從而實現(xiàn)對目標蛋白的檢測。

ELISA:在ELISA實驗中,HRP標記的二抗同樣能夠特異性地識別并結合山羊IgG,通過酶促反應放大信號,提高檢測的靈敏度。

其他免疫檢測:該二抗還適用于其他需要特異性識別山羊IgG的免疫檢測程序。


保存與穩(wěn)定性

保存條件:HRP標記的兔抗山羊IgG(H+L)通常需要在適當?shù)臏囟葪l件下保存,以保持其活性和穩(wěn)定性。具體保存條件可能因產品而異,但一般推薦在2-8°C或更低溫度下保存。

穩(wěn)定性:HRP標記的二抗在適當保存條件下通常具有較好的穩(wěn)定性。然而,長時間保存或不當處理可能會影響其活性和特異性。


注意事項

在使用HRP標記的二抗時,應嚴格按照產品說明書進行操作,避免非特異性反應和背景干擾。

考慮到不同實驗條件和樣本特性的差異,建議在使用前進行預實驗以優(yōu)化實驗條件。

對于需要長期保存的二抗,建議按照產品說明書中的推薦條件進行保存,并定期檢查其活性和穩(wěn)定性。

綜上所述,HRP標記的兔抗山羊IgG(H+L)是一種在免疫學實驗中廣泛應用的二抗,具有特異性高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點。然而,在使用時需要注意保存條件、操作規(guī)范以及實驗條件的優(yōu)化等問題。